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沒食子酸對人非小細胞肺癌A549細胞增殖的抑制作用

郗艷麗  許娜  李澍  王迪  王舒然  牛鳳蘭  
【摘要】:目的:探討沒食子酸對人非小細胞肺癌A549細胞增殖的抑制作用,闡明其藥物毒性的分子作用機制。方法:體外培養人非小細胞肺癌A549細胞,將A549細胞分為對照組及低、中和高劑量沒食子酸組,沒食子酸給藥劑量分別為0、300、500和750μmol·L~(-1)。MTT法檢測各組細胞存活率,瑞氏-姬姆薩染色液檢測各組A549細胞形態表現,流式細胞術檢測細胞凋亡率和活性氧(ROS)水平,Western blotting法檢測各組A549細胞中Fas和FasL蛋白的表達水平;分光光度法檢測各組A549細胞中過氧化氫酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)的活性。結果:與沒食子酸處理6h比較,處理12和24h時各劑量沒食子酸組A549細胞存活率明顯降低(P0.05),隨著作用時間延長,細胞存活率逐漸降低;沒食子酸處理24h后,與對照組比較,低、中和高劑量沒食子酸組A549細胞存活率明顯降低(P0.05)。瑞氏-姬姆薩染色,各劑量沒食子酸組細胞出現胞質皺縮,細胞體積變小、變圓等凋亡形態表現;隨著沒食子酸劑量增加,A549細胞凋亡率逐漸增加;隨著沒食子酸劑量的增加,A549細胞中Fas和FasL蛋白的表達水平有升高趨勢,且Fas與FasL蛋白表達水平呈正相關關系(r=0.92,P0.05)。與對照組比較,低、中和高劑量沒食子酸組A549細胞中ROS水平升高(P0.05);CAT活性升高,但組間比較差異無統計學意義(P0.05),且CAT活性隨沒食子酸劑量增加而逐漸降低。低劑量沒食子酸組A549細胞中SOD活性明顯高于對照組(P0.05);中和高劑量沒食子酸組A549細胞中SOD活性雖高于對照組,但組間比較差異無統計學意義(P0.05),且SOD活性隨沒食子酸劑量增加而逐漸降低。低劑量沒食子酸組A549細胞中GSH-Px活性高于對照組,但組間比較差異無統計學意義(P0.05);中和高劑量沒食子酸組A549細胞中GSH-Px活性低于對照組,但組間比較差異亦無統計學意義(P0.05);隨著沒食子酸劑量的不斷增加,GSH-Px活性反而降低。低、中和高劑量沒食子酸組間A549細胞中CAT、SOD和GSH-Px活性比較差異無統計學意義(P0.05)。結論:沒食子酸可能是通過誘導氧化損傷的方式抑制肺癌細胞增殖,Fas/FasL信號通路可能是其誘導細胞凋亡的重要作用機制之一。

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