蟾蜍靈對人非小細胞肺癌A549細胞增殖與凋亡的影響

【摘要】：背景與目的蟾蜍靈是從中藥蟾酥中提取出來的有效成分,其抗腫瘤作用已經在許多體外腫瘤細胞中得到證實,本研究旨在探討蟾蜍靈對人非小細胞肺癌細胞的增殖抑制、誘導凋亡作用及其機制。方法采用MTT法測定細胞活力,繪制細胞增殖抑制曲線;瑞氏-吉姆薩染色法觀察細胞形態學的變化;流式細胞儀通過PI染色進行細胞周期分析及凋亡判定;Westernblot法檢測Livin及Caspase-3蛋白的表達。結果蟾蜍靈以時間、劑量依賴方式抑制A549細胞增殖,48h、72h及96h抑制細胞增殖50%的藥物濃度(half maximal inhibitory concentration,IC50)分別為(56.14±6.72)nmol/L、(15.57±4.28)nmol/L及(7.39±4.16)nmol/L;蟾蜍靈能誘導肺癌細胞凋亡,形態學表現為出現凋亡小體及流式細胞儀檢測到的亞二倍體凋亡峰,凋亡率與對照組比較差異有統計學意義(均P0.01);蟾蜍靈誘導細胞凋亡過程中,下調Livin蛋白表達(P0.01),同時活化Caspase-3蛋白。結論蟾蜍靈能夠抑制肺癌細胞A549的增殖,并誘導其凋亡;抑制凋亡抑制蛋白Livin的活性及活化Caspase-3可能在其抑癌機制中發揮重要作用。