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《工業微生物》 2020年04期
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甲基營養菌MB200中mutL基因的突變及高耐甲醇菌株的篩選

聞東明  黃羅冬  楊青山  申佩弘  
【摘要】:甲基營養菌M.sp.MB200是本實驗室保存的一株可以利用甲醇為碳源的甲基營養菌,具有利用甲醇作為底物生產L-絲氨酸的能力。提高其耐底物濃度的能力,有利于L-絲氨酸的轉化。以M.sp.MB200野生菌株作為出發菌株,通過三親本結合進行同源單交換構建突變修復基因mutL插入突變菌株MB200mTB,該突變株無法修復菌體在繁殖傳代過程中產生的各種隨機突變,以甲醇為碳源進行環境壓力篩選,具有甲醇耐受突變的菌株可以在甲醇濃度不斷升高的環境中生長,而其余突變方向菌株在高甲醇環境下不能生長,進而篩選出甲醇耐受方向的突變株。對耐高濃度甲醇的菌株使用三親本結合回補mut L基因,得到了7株可以在甲醇濃度為7%的基礎培養基中生長性狀優異的突變株。在含7%甲醇的基礎培養基中,MB200mHB1號突變株較出發菌株M.sp.MB200甲醇耐受性提升近4倍,菌體生長量增加2.2倍。
【作者單位】廣西大學生命科學與技術學院
【分類號】:Q939.9

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